简答题

简述Southern印迹杂交的原理和方法。

正确答案

Southern印迹杂交是1975年Southern建立起来的一种杂交方法,属固相-液相杂交。该法的主要特点是利用毛细现象将DNA转移到固体支持物上,称为Southern转移或Southern印迹(Southernblot)。它首先用合适的限制性内切核酸酶将DNA切割,进行电泳分离后,利用干燥的吸水纸产生毛细作用,使液体经过凝胶,从而使DNA片段由液流携带从凝胶转移并结合在固体支持物表面,在通过和探针杂交来检测固体支持物表面的DNA。

答案解析

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  • Southern印迹杂交

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  • Northern印迹与Southern印迹有什么不同?

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  • 印迹杂交中常用的印迹方法有()、()、()、()。

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  • 你在做Southern印迹分析,并且刚完成了凝胶电泳这一步。根据方案,下面一步骤是用NaOH溶液浸泡凝胶,使DNA变性为单链。为了节省时间,你略过了这一步,直接将DNA从凝胶转至硝酸纤维素膜上。然后用标记探针杂交,最后发现放射自影片是空白。错在哪里?试分析其原因。

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