A不匹配的粘末端可通过部分填补后连接。
B同聚尾法连接不仅连接效率高,也易回收插入的片段。
C限制酶切割DNA后加入EDTA-SDS终止液抑制限制酶活性,将有利于重组连接。
DMg2+-ATP是T4DNA连接酶反应时的必须因素。
E平末端连接时,在反应体系中加入适量凝聚剂可提高连接效率。
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