简答题

简述生物样品中去除蛋白质的处理方法。

正确答案

(1)利用蛋白质脱水沉淀:采用有机溶剂如乙腈、甲醇、乙醇、丙酮等,或中性盐如硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等使蛋白质脱水而沉淀。用乙腈除去蛋白质,产生的沉淀容易分离,应用比较广泛,当用1~3倍体积的有机溶剂时,可使90%以上的蛋白质沉淀。
(2)利用蛋白质形成不溶性盐沉淀:常用的为酸性沉淀剂,如三氯醋酸、高氯酸、苦味酸或重金属离子等使蛋白质沉淀。
(3)其他方法:加热使蛋白沉淀,适用于样品对热稳定者。可将样品置沸水浴中,使蛋白质直接变性生成沉淀。或者采用超滤和透析方法,除去体液样品中的蛋白质,但费时,在分析大量的样品时,受到一定的限制。应用超滤和透析方法,在处理过程中样品内蛋白质并未变性,结合的待测成分未能被解脱出来而不能检出,此方法可测得血清或血浆中游离的待测成分的浓度。

答案解析

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