简答题

植物单细胞培养的程序及各步中应注意的事项

正确答案

1.建立细胞株
(1)材料准备
a.确定植物种类品种
b.选择单细胞或愈伤组织或叶肉、下胚轴等
c.借助酶处理:酶的种类、浓度、处理时间都对材料有一定影响
(2)制备细胞悬浮液
a.培养基成分筛选
b.悬浮培养,振荡次数为80~90次/min
c.用200~300目钢网过滤盒离心沉降
2.选择细胞株
平板筛选
a.细胞起始密度(0.5-2.5)*105个/ml
b.固体薄层培养基
c.按目标反复进行测定
3.扩大培养(或分化培养)
(1)扩大培养(悬浮)
(2)分化培养(固体)
抗性分析(生化分析)
4.鉴定分析
(1)扩大培养:鉴定提取:多次重复测定(生化分析)
(2)分化培养:植株再生
鉴定遗传分析:抗性测定、生化分析、遗传分析

答案解析

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