简答题

简述Sanger DNA测序法的原理。

正确答案

Sanger DNA测序法是建立在两个基本原理之上:
(1)核酸是依赖于模板在聚合酶的作用下由5′端向3′端聚合;
(2)可延伸的引物必须能提供游离的3′羟基末端,双脱氧核苷酸由于缺少游离的3′羟基末端,因此会终止聚合反应的进行。
如果分别用4种双脱氧核苷酸终止反应,则会获得4组长度不同的DNA片段。通过比较所有DNA片段的长度可以得知核苷酸的序列。

答案解析

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