简答题

电场强度是如何影响电泳分离

正确答案

电场强度大,带电质点的迁移率加速,因此省时,但因产生大量热量,应配备冷却装置以维持恒温。电场强度大时:
①样品和缓冲离子扩散速度增加,引起样品分离带的加宽;
②产生对流,引起待分离物的混合;
③如果样品对热敏感,会引起蛋白变性;
④引起介质粘度降低、电阻下降等等。
电泳中产生的热通常是由中心向外周散发的,所以介质中心温度一般要高于外周,尤其是管状电泳,由此引起中央部分介质相对于外周部分粘度下降,摩擦系数减小,电泳迁移速度增大,由于中央部分的电泳速度比边缘快,所以电泳分离带通常呈弓型。降低电流强度,可以减小生热,但会延长电泳时间,引起待分离生物大分子扩散的增加而影响分离效果。所以电泳实验中要选择适当的电场强度,同时可以适当冷却降低温度以获得较好的分离效果。

答案解析

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