简答题

如何检查一种酶的制剂是否达到了纯的制剂?试用所学过的知识加以论述。

正确答案

要检测酶的制剂是否达到纯的制剂(即不含杂质及杂质酶),可以有以下几种方法:
(1)层析法:包括纸层析、凝胶层析、柱层析及亲和层析
(2)电泳法:包括SDS凝胶电泳法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法
(3)超离心法:不同的酶分子大小不同,在重力场中具有不同的沉降系数,从而可以通过超离心方法分离目的酶与杂质酶。
(4)免疫反应法:由于酶分子可作为一种抗原物质,而抗原与抗体之间具有专一的亲和力,故可选用目的酶的抗体与酶制剂进行免疫扩散或免疫电泳,从而判断酶的制剂是否纯净。
(5)氨基酸序列分析法:采用特定的化学物质从酶的N末端将氨基酸残基逐个水解下来,最终可获知该酶的氨基酸序列,从而也可以判断出酶制剂是否纯净。

答案解析

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