用限制性内切酶将某种生物的DNA切成不同片段，并把所有片段随机地分别连接到用同样内切酶切过的基因载体上，然后分别转移到适当受体细胞中，如细菌。通过细胞增殖而构成各个片段的无性繁殖系或克隆。如果所制备的克隆数目已多到可把某种生物的全部基因都包含在内时，这一组克隆就成为该种生物的（）

用相同的限制性内切酶切割DNA留下的粘性末端是一定（）的；用不同的限制性内切酶切割DNA留下的粘性末端一定是（）的。

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基因重组操作中常用的工具酶有：限制性核酸内切酶、DNA连接酶、（）、（）、（）

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解旋酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、限制性内切酶都能作用于DNA分子，它们的作用部位都是（）。

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DNA重组通常包括如下五个步骤： ⑴获得需要的目的基因（外源基因）。  ⑵用重组DNA分子（重组质粒）转化受体细胞，使之进入受体细胞并能够在受体细胞内复制和遗传。  ⑶对获得外源基因的细胞或生物体通过发酵、细胞培养、养殖和栽培等，最终获得所需的遗传性状或表达出所需的产物。  ⑷经过限制性内切酶酶解和连接酶作用，形成重组DNA分子，并对其加以克隆和筛选。  ⑸对获得外源基因的受体细胞（转化子）进行筛选和鉴定。  上述五个步骤按通常的操作技术应依（）顺序进行。

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用限制性内切酶切割得到的（）基因，导入大肠杆菌细胞后不能得到有效的表达。

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在诊断胎儿的镰形细胞贫血症时，首先要从羊水或绒毛膜中提取DNA，然后用限制性内切酶MstII对DNA酶解如果β-血红蛋白基因发生突变且是杂合子，即β-血红蛋白等位基因中一个是正常的，具有3个MstII位点，另一个携带着突变片段，即只有2个MstII位点，RFLP分析结果便会同时出现（）个小的条带和（）个大的条带。

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限制性内切酶的特点（），（），（）。

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限制性内切酶的切割方式（），（），（）。

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限制性内切酶/限制酶

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