单向琼脂扩散试验时错误的做法是（）。

A采用特异性强效价高的抗血清

B每次测定必须做标准曲线

C琼脂糖煮化后应立即加入抗血清，以免琼脂凝固

D试验时应加入标准抗原作为参考

E放置于37℃反应，24～48小时后观察结果