简答题

试述用艾姆氏(Ames)法检测致癌剂的理论依据、方法概要和优点。

正确答案

原理:
(1)“生物化学统一性”法则:人和细菌在DNA的结构及特性方面是一致的;能使微生物发生突变的诱变剂必然也会作用于人的DNA,使其发生突变,最后造成癌变或其他不良的后果。
(2)诱变剂的共性原则:化学药剂对细菌的诱变率与其对动物的致癌性成正比;超过95%的致癌物质对微生物有诱变作用;90%以上的非致癌物质对微生物没有诱变作用。步骤:鼠伤寒沙门氏菌的组氨酸营养缺陷型(his-)菌株在基本培养基[-]的平板上不能生长,如发生回复突变变成原养型(his+)后则能生长。 即在含待测可疑“三致”物例如黄曲霉毒素、二甲氨基偶氮苯(俗名“奶油黄”)、“反应停”等的试样中,加入鼠肝匀浆液,经一段时间保温后,吸入滤纸片中,然后将滤纸片放置于上述平板中央。经培养后,出现3种情况:
(1)在平板上无大量菌落产生,说明试样中不含诱变剂;
(2).在纸片周围有一抑制圈,其外周出现大量菌落,说明试样中有某种高浓度的诱变剂存在;
(3)在纸片周围长有大量菌落,说明试样中有浓度适当的诱变剂存在。优点:此法具有快速(约3天)、准确(符合率>85%)和费用省等优点。由于生物体内、体外可能存在的差异,可在体外加入哺乳动物(如大鼠)微粒体酶系统,使待测物活化,使Ames试验的准确率达80-90%。

答案解析

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