简答题

载体DNA与外源基因链接的方法有哪几种?

正确答案

(1)黏性末端连接法:DNA连接酶,辅助因子NAD+提供能量。
(2)平末端连接法:
①同聚物加尾法:利用末端脱氧核苷酸转移酶,不直接使用T4DNA连接酶,连接效率低。
②衔接物连接法:用化学方法合成的,由10~12个核苷酸组成,具有1个或数个限制性内切酶位点的平末端双链寡核苷酸片段称衔接物。
③人工接头连接法:一端是平端,另一端是黏性末端,衔接物两端都是平末端。

答案解析

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