简答题

悬浮培养细胞同步化得方法有哪些?

正确答案

1、物理方法
(1)体积选择法:将培养一段时间的细胞经过一定大小的筛网过滤,收集筛网上层的细胞;再经过较小孔径筛网上面的细胞.选择每一孔径筛网过滤得到的细胞分别再进行培养。
(2)冷处理法:收集细胞,在4℃温度下处理数天,添加新鲜培养液培养。
2、化学方法
(1)饥饿法:先对细胞断绝供应一种进行细胞分裂所必需的营养成分或激素,使细胞停滞在G1期或G2期,经过一段时间的饥饿之后,当重新在培养基中加入这种限制因子时,静止细胞就会同步进入分裂。
(2)抑制法:通过向培养基中添加尿苷(1μg/ml),5-氟脱氧尿苷(2μg/ml)等化学抑制剂抑制细胞分裂,可使培养细胞同步化。
(3)有丝分裂抑制法:在指数生长期的细胞悬浮培养物中加入一定浓度的秋水

答案解析

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