简答题

薄层色谱法及氨基酸自动分析仪法分离及测定氨基酸的原理

正确答案

(1)薄层色谱法分离氨基酸原理
取一定量经水解的样品溶液,滴在制好的薄层板上,在溶剂系统中进行双向上行法展开,样品各组分在薄层板上经过多次的被吸附、解吸、交换等作用,同一物质具有相同的Rf值(比移值),不同成分则有不同的Rf值,因而各种氨基酸可达到彼此分离的目的。然后用茚三酮显色,与标准氨基酸进行对比,即可鉴别样品中所含氨基酸的种类,从显色斑点颜色的深浅可大致确定其含量。
(2)氨基酸自动分析仪法测定氨基酸的原理
利用各种氨基酸的酸碱性、极性和相对分子质量大小不同等性质,使用阳离子交换树脂在色谱柱上进行分离。当样液加入色谱柱顶端后,采用不同的pH和离子浓度的缓冲溶液即可将它们依次洗脱下来,即先是酸性氨基酸和极性较大的氨基酸,其次是非极性的芳香性氨基酸,最后是碱性氨基酸。洗脱下来的氨基酸可用茚三酮显色,从而定量各种氨基酸。

答案解析

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