简答题

提高外源基因表达水平的措施有哪些?

正确答案

(1)提高翻译水平
①调整SD序列与ATG之间的距离。
②用点突变的方法改变起始密码子下游的几个密码子。
③增加mRNA的稳定性。
(2)使细菌的生长与外源基因的表达分开
将宿主菌的生长和外源基因的表达分成两个阶段,是减轻宿主细胞代谢负荷最为常用的一个方法。常采用温度诱导或药物诱导基因表达。
(3)提高表达蛋白的稳定性
在大肠杆菌中表达的外源蛋白往往不够稳定,易被细胞的蛋白酶降解,因而会使外源基因的表达水平大大降低。因此,提高表达蛋白的稳定性,防止细菌蛋白酶的降解是提高外源基因表达水平的有力措施。
①表达融合蛋白。②采用某种突变菌株,可使大肠杆菌蛋白酶合成受阻,从而使表达蛋白得到保护,不被降解。③表达分泌蛋白。

答案解析

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