革兰氏染色中最关键的一步是哪一步？为什么？

最关键的一步是脱色，重点是掌握脱色时间。如果脱色过度，对于G+细菌来说，经乙醇脱色处理，细胞内的结晶紫和碘形成的紫色复合物也会随乙醇一同洗脱出去，细胞变成无色，经番红复染后菌体呈红色，鉴定为G-，出现假阴性；相反，对于G-细菌来说，如果脱色不足，会出现假阳性。

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