简答题

质粒DNA纯化的标准方法是什么？如何操作？

CsCl-EB法是一种沉降平衡离心法，至今仍是质粒DNA纯化的标准方法。经超速离心，离心介质CsCl形成一连续的密度梯度，在过量EB存在的条件下，各种不同密度的物质经离心平衡后得以分开。蛋白质由于密度小（1.3～1.49／cm

）而浮于液面，RNA密度大而沉于管底，各种DNA密度介于蛋白质与RNA之间，处于中部。细菌染色体DNA与不同分子构型的质粒DNA的密度均为1.79／cm

左右，难以区分，经过量EB处理后，不同分子构型的DNA与EB的结合能力不一样，因而密度下降不一致，可将它们有效分离开。

略

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