单选题

基因工程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒,便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-。根据图示,判断下列操作正确的是()

A质粒用限制酶Ⅰ切割,目的基因用限制酶Ⅱ切割

B质粒用限制酶Ⅱ切割,目的基因用限制酶Ⅰ切割

C目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割

D目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

正确答案

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答案解析

限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-,酶Ⅱ的识别序列是酶Ⅰ识别序列的一部分。 如果质粒用酶Ⅱ处理,那么在GeneⅠ和Ⅱ区都会被切断,质粒变成了两段线性序列,所以质粒只能用限制酶Ⅰ切割。 如果目的基因用酶Ⅰ处理,切割出1个黏性末端;用酶Ⅱ切割目的基因后,两段形成的粘性末端均为GATC,可以与质粒形成重组DNA;选A。 考点:限制酶的选择。 点评:本题设计较为巧妙,考查学生分析问题的能力,基本知识必须扎实。
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  • 下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。如图,已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用BamHⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段(假设所用的酶均可将识别位点完全切开),下列各种情况中,可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是()

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  • 下图一为含有目的基因的DNA(外源DNA),图二为某质粒,表中是几种限制酶识别序列及其切割位点。用图中的外源DNA与质粒构建重组质粒。 请根据上述信息分析回答:

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  • 下图一为含有目的基因的DNA(外源DNA),图二为某质粒,表中是几种限制酶识别序列及其切割位点。用图中的外源DNA与质粒构建重组质粒。 请根据上述信息分析回答:

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