正确答案
以乳酸为底物的反应称为顺向反应,以丙酮酸为底物的反应称为逆向反应。
(1)顺向反应的优点:
①此法所需的氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)较逆向反应需用的还原性辅酶Ⅰ(NADH)稳定,易得纯品,含抑制LDH的杂质少,价格也较低。
②乳酸钠(或乳酸锂)底物比丙酮酸底物稳定。
③过量乳酸对LDH的抑制低于过量丙酮酸对LDH的抑制。
(2)逆向反应的优点:
①NADH用量少,只是正向反应所用NAD+的3%。
②酶反应速率也比乳酸盐法快,单位时间内吸光度的变化较大,能使用比较少的样品在较短的时间内进行测定。
③酶活力随时间的线性关系较长。
④用NADH或丙酮酸盐启动反应,其反应速度相同,而由乳酸盐到丙酮酸盐的反应中,LDH活力取决于使用的启动剂。