简答题

简述分光光度法测定叶绿素a的主要操作步骤。

正确答案

(1)在抽滤器上装好乙酸纤维滤膜,对定量体积水样进行抽滤。
(2)取出滤膜,在冰箱内低温干燥6~8h,放入组织研磨器中,加入少量碳酸镁粉末及2~3m190%丙酮,充分研磨,提取叶绿素a,离心分离,将上清液倒入5m1或10ml容量瓶中。
(3)再用2~3m190%丙酮继续研磨提取,上清液转入容量瓶中,重复1~2次,用90%丙酮定容。
(4)用1cm比色皿,分别测定上清液在750nm、663nm、645nm和630nm的吸光度,并以90%丙酮作空白吸光度测定,对样品吸光度进行校正。

答案解析

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