关于分区划线分离法，错误的是（）

A适用于杂菌量较多的标本

B一般分为四个区，将标本均匀涂布于第一区

C自第二区开始，各区内依次进行连续划线

D每一区划线均接触上一区的接种线1～2次

E接种前以及接种完毕后，接种环要灭菌