简答题

简述λ噬菌体载体的克隆原理及一般步骤?

正确答案

原理:载体和外源DNA经酶切后,外源DNA片段插入到载体的适当位置,或置换载体的填充片段。连接形成重组子在体外噬菌体蛋白作用下,包装形成噬菌体颗粒,通过噬菌体颗粒感染大肠杆菌将重组DNA注射到宿主中,经过裂解生长,可增殖重组DNA。
步骤:
①通过裂解过程增殖载体
②回收、分离纯化载体
③载体与外源DNA的酶切
④外源DNA与载体的连接
⑤重组噬菌体的体外包装
⑥包装噬菌体颗粒感染宿主
⑦筛选。

答案解析

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