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双脱氧核苷酸末端终止法

正确答案

在DNA合成反应体系中,除含有正常脱氧核苷三磷酸底物外,还加入少量的双脱氧核苷三磷酸(ddNTPs)特殊底物,由于这种底物的5′-磷酸基团是正常的,能够替代相对应的脱氧核苷三磷酸而与引物延伸链的3′羟基连接,进入部分新合成链;但由于这种特殊底物不存在3′羟基末端,故下一个核苷酸底物不能通过5′-磷酸基团与之形成3′,5′-磷酸二酯键,从而导致DNA新链的延伸提前终止于这一“异常”核苷酸处,而掺入的双脱氧核苷三磷酸则位于DNA延伸链的最末端。

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