分析影响限制性内切核酸酶酶切的因素有哪些？

（1）反应温度：
连接缺口的温度：37度
连接粘性末端的最佳温度：4～15度
（2）T4DNA连接酶的用量：
平末端DNA分子的连接反应中，最适1～2个单位。
粘性末端DNA片断之间的连接，酶浓度0.1个单位
ATP的用量10μmol-1mmol/L之间
（3）提高外源片断与载体的浓度的比值（10～20倍）

略