简答题

简述粗酶液净化、脱色及浓缩的原理与方法。

正确答案

粗酶液的净化与脱色
A.细胞、细胞碎片离心、过滤
B.核酸核酸酶或鱼精蛋白
C.黏多糖乙醇、单宁酸、离子表面活性剂
D.黏度过大加絮凝剂处理
(2)粗酶液的脱色
A.活性炭0.1%-1.5%
B.离子交换树脂DuoliteS-30、通用1号粗酶液的浓缩
(1)沉淀法
用盐析法或有机溶剂将蛋白质沉淀,在将沉淀容分解在小体积溶液中。
(2)超滤法
利用不同的超滤膜来浓缩,此方法简便、迅速、温和、处理样品量可达可小。
(3)凝胶吸水法
向蛋白质溶液中加入固体Sephadex-25等吸水剂。蛋白质收率较低。
(4)离子交换法
吸附到离子交换剂上,然后用少量盐溶液洗脱下来。
(5)透析法
将聚乙二醇(PEG)涂于装有蛋白质溶液的透析袋上,置于4ºC。为防止PEG进入蛋白质溶液,最好用分子量大的PEG(如PEG20000)。
(6)真空浓缩。
(7)冷冻浓缩。
(8)蒸发浓缩。

答案解析

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