正确答案
1)细胞种质影响:选择次生产物含量高和合成次生物质部位的细胞为培养对象。
2)选育高产细胞系
直接筛选法:对物种的愈伤组织培养物多次进行比较,选择出次生代谢产物含量高、生长良好的细胞系 诱变法:利用射线对愈伤组织进行诱变,再进行平板培养,进而筛选出次生代谢产物含量高的细胞系。 基因工程细胞株:关键酶 转录因子
3)培养基
生长培养基 高激素 低胁迫 生产培养基 低激素 胁迫
4)二阶段培养法:二阶段法连续培养可以提高次生产物含量
5)两相法培养:该法可减轻产物本身对细胞代谢的抑制作用,并可保护产物免受培养基中催化酶或酸对产物的影响。此外,由于产物在固相或疏水相中的积累简化了下游处理过程,所以,可大幅度降低生产成本。
6)固定化培养:利于细胞组织化,可提高次生代谢产物含量。
7)培养基成分:一般地说,提高碳、氮、硝酸盐、钾和磷酸盐的浓度倾向促进细胞快速生长,而耗尽时,强烈地刺激次级生代谢。
其中磷酸盐影响最大,开始时降低磷酸盐水平,可强烈促进次生代谢产物产生,这可能是低能荷解除了对次生代谢的抑制作用
8)植物生长调节剂:生长素、细胞分裂素、赤霉酸(GA),脱落酸(ABA),乙烯能有效地触収次生代谢。因为植物细胞培养中,次生代谢物的产生是细胞增殖及分裂的凼数,对次生代谢物有较大影响。
9)植物细胞大规模培养方式
悬浮培养法(主要) 半连续培养法 连续培养法 分批培养法 固定化培养法
10)环境因素的影响
A.光(光照时间、光质及光强):如烟草细胞培养物连续暗处理,其尼古丁含量高于连续光照处理; 黄酮醇葡萄糖苷合成对波长在320毫微米以下的紫外光敏感,照射后光敏色素系统激収次生代谢途径。
B.温度:温度影响细胞的生长,一般植物细胞于20℃~32℃培养时良好,应根据不同的植物材料和生理代谢要求,选择合适温度
C.搅拌和通气:搅拌过慢减少气体交换量,影响呼吸代谢,过快易破坏细胞。
11)前体饲喂:在植物细胞培养中加入次生代谢物生物合成的前体,是提高次生代谢物产量的有效途径。
12)诱导子:诱导子是一种能引起植物过敏反应的物质,由于它在不植物的相互作用中,能快速、高度与一和选择性的诱导植物特定基因的表达,进而活化特定次生代谢途径,积累特定的目的次生代谢物,所以可以利用它来提高植物次生代谢产物的产量.