题干本题共包含 3 个小题

大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列,位于该质粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出b-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X-gal时,X-gal便会被b-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达b-半乳糖苷酶,培养基中的X-gal不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。据图回答下列问题:

填空题1

作为受体大肠杆菌应()(填“含有”或“不含有”)氨苄青霉素抗性基因,以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。取用氯化钙溶液处理(增加其细胞壁的通透性)过的受体大肠杆菌,置于试管Ⅱ中,完成基因工程操作的()步骤(具体步骤)。如果受体细胞是植物细胞,则通过()转化作用将目的基因导入受体细胞,因为其Ti质粒中的T—DNA有()特点。

正确答案

不含;目的基因导入受体细胞;农杆菌;可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体DNA上

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填空题2

图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入()等物质,用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。

正确答案

IPTG、X-gal和氨苄青霉素

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填空题3

将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养,以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒,请预测菌落的颜色,并分析结果: ①()。 ②()。

正确答案

①如果长出蓝色菌落,说明没有与目的基因重组的质粒已转入受体菌(或说明重组质粒没有导入受体大肠杆菌
②如果长出白色菌落,说明重组质粒已导入受体大肠杆菌

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