简答题

影响DNA连接酶催化连接反应的因素有哪些?

正确答案

(1)DNA的纯度
(2)DNA甲基化的程度
(3)酶切消化反应的温度
(4)DNA的分子结构
(5)核酸内切限制酶的缓冲液

答案解析

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  • DNA连接酶催化的连接反应需要能量,大肠杆菌的能量来源是(),动物细胞则以()为能源。

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  • 在大肠杆菌中,DNA连接酶所催化的反应需NAD+作为氧化剂。

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  • 某种线性DNA含有限制性核酸内切酶EcoRI的1个酶切位点。该DNA样品(甲)经EcoRI酶切后,在DNA连接酶催化下形成产物乙。则反应液中产物乙共有()

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  • DNA连接酶只能催化()链DNA中的缺口形成3’,5’—磷酸二酯键,不能催化两条()链间形成3’,5’—磷酸二酯键,真核生物DNA连接酶以()作为能源,大肠杆菌则以()作为能源,DNA连接酶在DNA()、()、()中起作用。

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  • 不需要DNA连接酶参与的反应是()

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  • 影响酶催化活性的因素有哪些?

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  • 提高重组率的方法包括(I加大外源DNA与载体的分子之比II载体分子除磷III连接酶过量IV延长连接反应时间)()

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  • 影响酶促反应的因素有降低反应的活化能、邻近效应和定向效应、酶使底物分子中的敏感键发生变形、多功能催化作用(酸碱催化和共价催化)、金属离子的催化作用和微环境的影响。

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  • 影响酶催化反应的因素。

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