简答题

建立SSR标记必须克隆足够数量的SSR并进行测序,设计相应的PCR引物。请说出其一般程序。

正确答案

①建立基因组DNA的质粒文库;
②根据欲得到的SSR类型设计并合成寡聚核苷酸探针;
③对阳性克隆DNA插人序列测序;
④根据SSR两侧序列设计并合成引物;
⑤以待研究的植物DNA为模板,用合成的引物进行PCR扩增反应;
⑥高浓度琼脂糖凝胶、非变性或变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其多态性。

答案解析