单选题
关于聚合酶链反应(PCR)引物的叙述正确的是()。
A引物是一条人工合成的寡核苷酸片段
B引物序列与模板DNA的待扩增区互补
C在已知序列的模板DNA待扩增区两端各有一条引物
D引物自身应该存在互补序列
E引物的3’端可以被修饰
答案解析
进行PCR扩增的首要条件是设计一对人工合成的寡核苷酸引物。该引物序列与待扩增DNA模板两端的碱基序列互补。引物设计的原则包括:
①引物长度15~30个碱基,不能超过38个;
②G+C含量一般为40%~60%;
③碱基分布随机,避免数个嘌呤或嘧啶的连续排列;
④引物自身不应存在互补序列;
⑤两个引物之间不应有多于4个的互补序列;
⑥引物的3’端不应有任何修饰,5’端则可以被修饰;
⑦引物应有特异性。