单选题

经HRP作用后变为蓝色,加入硫酸终止反应后变为黄色的是()

A邻苯二胺(OPD.

B过氧乙酸

CC.四甲基联苯胺(TM

D对-硝基苯磷酸酯

E4-甲基伞酮基-R-D半乳糖苷(4-MUU)

正确答案

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答案解析

HRP最敏感的色原底物,在HRP的作用下显橙黄色,加强酸如硫酸或盐酸终止反应后呈棕黄色,最大吸收峰在492nm波长。其反应液稳定性差,易变色,需在配置后1小时内使用,显色反应过程需避光,且具有致癌性。4-甲基伞酮基-R-D半乳糖苷(4-MUU)常用作β-半乳糖苷酶(β-Gal)的底物,酶作用后生成高强度荧光物4-甲基伞形酮(4-MU),测量时需用荧光剂。TMB经HRP作用后变为蓝色,加入硫酸终止反应后变为黄色,最大吸收峰波长为450nm。对-硝基苯磷酸酯经AP作用后产物为黄色对硝基酚,最大吸收峰波长为405nm。
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