简答题

什么是随机引物(randomprimer)?如何标记DNA?

正确答案

随机引物是人工合成的长度为6个核苷酸的寡聚核苷酸片段群体,含有各种可能的排列顺序(46=4096);或是用DNase处理小牛胸腺DNA后获得的6~12个碱基的片段。将待标记的DNA片段同随机引物一起进行杂交,并以杂交体上的寡聚核苷酸为引物,在Klenow酶的作用下合成互补DNA链,当反应底物中有放射性的dNTP时,新合成的DNA就带上了标记。

答案解析

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  • 随机引物标记探针时,双链DNA、单链DNA、RNA都是可以标记的。

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  • 随机引物标记探针时,不需要用DNaseI预处理。

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  • 随机引物标记探针的特异性较PCR掺入法高。

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