简答题

试分析提高平端DNA连接效率的可能方法。

正确答案

1、低温下长时间的连接效率比室温下短时间连接的好。
2、在体系中加一点切载体的酶,只要连接后原来的酶切位点消失。这样可避免载体自连,应该可以大大提高平端连接的效率。
3、足够多的载体和插入片段是最重要的。
4、平端的连接对于离子浓度很敏感
5、尽可能缩小连接反应的体积
6、建议放在四度冰箱连接两天效率更高比14度好

答案解析

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