简答题

重组体分子的选择方法主要有哪些?并简单阐述其原理。

正确答案

从总体上看,重组体分子的选择与鉴定方法基本上可以分为如下几个类型:
(1)基于载体遗传标记检测法
在构建基因工程载体系统时,载体DNA分子上通常携带了一定的选择性遗传标记基因,转化或转染宿主细胞后可以使后者呈现出特殊的表型或遗传学特性,据此可进行转化子或重组子的初步筛选。
(2)基于克隆DNA序列检测法
Southern印迹杂交:根据毛细管作用的原理,使在电泳凝胶中分离的DNA片段转移并结合在适当的滤膜上,然后通过与已标记的单链DNA探针的杂交作用以检测这些被转移的DNA片段。
(3)基于外源基因产物检测法
如果目的基因产物能降解某些药物使菌株呈现出抗性标记,或者基因产物与某些药物作用是显颜色反应,则可根据抗性或颜色直接筛选含目的基因的克隆子。

答案解析

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