简答题

当两种限制酶反应条件不同时,若要用双酶切,应采取什么措施?为什么?

正确答案

要避免星活性及部分酶切。
(1)先用低盐缓冲液中活性最高的酶切,再补盐和第二种酶;
(2)用一种酶消化后,以酚:氯仿:异戊醇抽提,再经乙醇沉淀,将DNA重新溶解与适合第二种酶的缓冲液,加第二种酶消化;
(3)先低温酶,后高温酶;
(4)使用通用缓冲液。

答案解析

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