简答题

2-DE的基本操作步骤是什么？

正确答案

（1）样品制备，包括蛋白质的溶解、变性、还原以及去除蛋白质杂质等；
（2）IPG胶的制备，利用不同pK固定化电解质的组合可配制不同pH范围的凝胶；
（3）双向电泳，先进行第一向电泳：等电聚焦凝胶电泳，再进行第二向电泳：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳；
（4）蛋白质的染色，电泳后对蛋白质的检测方法有很多种，其灵敏度和分辨率有差异，主要根据上样量的多少及样品进一步分析要求等加以选择，常用的方法有考马斯亮蓝染色、银染、铜染等。

答案解析

略

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