简答题

PCR引物设计的原则主要有哪些?

正确答案

(1)引物长度:10~30Nt;
(2)碱基分布:A、T、G、C随机分布;
(3)G+C含量:40%~60%Tm=4(G+C)+2(A+T);
(4)引物之间:避免3′端互补;
(5)引物自身:不应形成二级结构;
(6)引物3′末端碱基:最好选T、C、G,不选A;
(7)引物5′末端碱基:可不与模板DNA互补。

答案解析

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