简答题

已知蛋白质P(由基因p编码,序列已知)可以在某动物传代细胞C(该细胞可在体外培养和传代)中激活基因g(序列已知)的转录,即P是基因g的一个转录因子,请你设计实验,确定基因g上游的转录因子P的调控区,并进行验证。

正确答案

制造基因突变(置换突变):首先将一系列6-10bp的置换突变体(不能使用更小的突变体,因为突变体应该足够的小,使重要调控元件能定位在相当精确的位置上;但也不能太小,因为将会需要更多的突变体,从而增加工作量,也有可能改变调控元件的排列,从而影响转录因子与该区域的结合。)导入蛋白质P,然后将蛋白质P导入某动物传代细胞C中进行体外培养和传代,接着对功能性启动子区域进行扫描突变分析,从而确定基因g上游的转录因子P的调控区,同时也可由此鉴定处于调控区域之内的各个调控元件。

答案解析

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