简答题

简述基因工程操作的主要步骤。

正确答案

基因工程一般要经历5个基本步骤:
1)获取目的基因
两条途径:人工合成和从生物基因组DNA中直接分离得到。
2)目的基因和载体DNA在体外连接
用同一种限制性内切酶分别切割载体DNA和目的基因。在合适的条件下,载体质粒的黏性末端与目的基因的黏性末端因碱基互补配对而结合,再经适量的DNA连接酶作用,就形成了重组DNA分子。
3)将重组的DNA分子引入合适的宿主细胞内
重组DNA分子导入受体细胞的方法包括:转化和转导。
4)选择、筛选含有目的基因的克隆
检测的方法很多,一般根据载体的特征或者目的基因的特征。
5)培养、观察目的基因的表达
看目的基因能否在新的宿主细胞中定居下来,自我复制和表达,并稳定传代。

答案解析

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