简答题

试设计至少两个实验证明膜蛋白的流动性。

正确答案

荧光抗体免疫标记实验:用抗鼠细胞膜蛋白的荧光抗体(显绿色荧光)和抗人细胞膜蛋白的荧光抗体(显红色荧光)分别标记小鼠和人的细胞表面,然后用灭活的仙台病毒处理使两种细胞融合,10min后不同颜色的荧光在融合细胞表面开始扩散,40min后已分辨不出融合细胞表面绿色荧光或红色荧光区域,如加上不同的滤光片则可观察到红色荧光或绿色荧光都均匀地分布在融合细胞表面。此实验清楚地显示了与抗体结合的膜蛋白在质膜上的运动。光脱色荧光恢复技术:首先用荧光物质标记膜蛋白或膜脂,然后用激光束照射细胞表面某一区域,使被照射区域的荧光淬灭变暗形成一个漂白斑。由于膜的流动性,漂白斑周围的荧光物质随着膜蛋白或膜脂的流动逐渐将漂白斑覆盖,使淬灭区域的亮度逐渐增加,最后恢复到与周围的荧光强度相等。这种方法不仅能够证明膜的流动性,同时也能测量膜蛋白扩散的速率。

答案解析

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