简答题

利用何种实验可证明生物膜中蛋白质有侧向扩散运动?其速度如何测定?

正确答案

细胞融合法:将两种不同细胞膜表面抗原分别用不同颜色的荧光物质标记,然后两细胞融合,随时间延长,每一种荧光标记物将向其对侧扩散,最后完全混合在一起,表明生物膜中蛋白质有侧向扩散运动
冷冻断裂法:把细胞膜在冷冻条件下劈裂,裂面将沿着膜脂的输水区延伸并断裂,而将包埋
于膜脂中的蛋白质分子暴露出来,经金属投影制备复型后在电镜下观察,即可了解膜蛋白分子的分布及其变化。
荧光漂白恢复技术——膜蛋白侧向扩散速度
先用单价荧光抗体标记膜蛋白;用激光束照射细胞表面的某一区域,使被照射区因荧光淬灭而变暗;由于膜蛋白的侧向扩散,被照射区的荧光强度因光“漂白”分子的离开和未“漂白”分子的进入而逐渐增强,最后恢复到与周围的荧光强度相等;根据荧光强度恢复的速度——膜蛋白扩散速度

答案解析

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