培养基配好后，为什么必须立即灭菌?如何检查灭菌后的培养基是否无菌？为什么要倒置培养？

由于配制培养基的各类营养物质和容器等含有各种微生物，因此，已配制好的培养基必须立即灭菌，如果来不及灭菌，应暂存冰箱内，以防止其中的微生物生长系列而消耗养分和改变培养基的酸碱度所带来的不利影响。将灭菌的培养基放入37℃温箱中培养24～48h，无菌生长即可证明灭菌后的培养基无菌。倒置培养的主要目的：󰀀1）由于重力的作用使培养基表面及次层能富集微生物生长所需的营养物质，利于微生物生长；󰀀2）防止空气中微生物的污染培养基及培养物：倒置时平板内的空气是不流动的，杂菌不会沉降到培养基表面，如果不倒置，很快平板周边会长起杂菌。󰀀3）倒置培养使琼脂里水分不易蒸发出去，而充分的保持琼脂的弹性与细菌容易繁殖和生存的环境。如果不倒置，大概3天左右培养基就会出现龟裂等水分散失的情况。而一些落菌等试验，需验证培养基无菌，就要先倒置培养48小时才可作为模板做落菌，水分散失是很重要的。

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