简答题

简述酶促切割错配检测基因突变的原理及其优、缺点。

正确答案

酶促切割错配(enzyme mismatch cleavage,EMC)利用T4内切核酸酶VII识别12种错配碱基并在附近进行酶切的特性,将核酸探针与待检分子杂交,有点突变时杂交分子中有错配出现,为T4内切核酸酶VII识别切割,根据凝胶电泳中片段数量和大小判断有无突变。
优点:能对DNA:RNA异源杂合分子进行分析,最长检测片段达1.5kb。
缺点:产生非特异性切割,检出效率不能保证100%,必须设立内对照。

答案解析

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