简答题
何谓基因工程?阐述基因工程的基本操作过程。在一利用pBR322质粒和BamHⅠ构建“工程菌”的实验中,如何筛选含有目的基因的宿主细菌?
正确答案
基因工程是指人们利用分子生物学的理论和技术,自觉设计操纵改造和重建细胞的遗传核心——基因组,从而使生物体的遗传性状发生定向变异,以最大限度地满足人类活动的需要。基因工程的基本操作包括目的基因的取得,载体系统的选择,目的基因与载体重组体的构建,重组载体导入受体细胞,工程菌株的表达和检测等。
大肠杆菌的pBR322质粒上有两个抗药性标记,即氨苄青霉素抗性和四环素抗性标记,限制酶BamHⅠ在该质粒上的插入点在四环素抗性基因上,当外源DNA片段插入后会引起四环素抗性基因失活。制备四环素平板、氨苄青霉素平板,将已转化的宿主细胞涂布,若在四环素平板上不能生长,在氨苄青霉素平板上能生长,则证明该菌已含有目的基因;若在两种平板上都能生长,则该菌不含目的基因。